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            細胞學堂 | 手把手教你培養SV-HUC-1

            更新時間:2023-11-14  |  點擊率:537

            SV-HUC-1 (人輸尿管上皮永生化細胞),是由猿猴空泡病毒40轉染至1名11歲男孩的泌尿道上皮細胞,而建立起來的永生化細胞系。其分化特性與正常細胞相似,培養簡單,可無限傳代,卻不屬于腫瘤細胞[1]。



            基礎信息


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            生長培養基:

            Ham's F-12K+10% FBS+1% P/S

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            生長特性:貼壁,上皮細胞樣

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            推薦傳代比例:1:2-1:4

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            推薦換液頻率:2~3次/周

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            培養條件:

            氣相:空氣,95%;CO2,5%

            溫度:37℃

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            凍存條件:

            55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO


            SV-HUC-1細胞正常生長

            SV-HUC-1細胞正常生長


            細胞傳代


            01

            從培養容器中吸出用過的細胞培養基并丟棄;

            02

            PBS沖洗細胞(每10cm2培養表面積約2mL 溶液)。從與貼壁細胞層相對的容器一側輕輕加入沖洗液,以避免攪動細胞層,前后輕柔搖晃容器數次;

            03

            從培養容器中吸出沖洗液并丟棄,向培養瓶中加入0.25%胰酶(試劑量應足以覆蓋細胞層);

            04

            輕輕搖晃容器,使試劑*覆蓋細胞層,T25 細胞培養瓶留 200μL左右即可;

            05

            將培養容器放在培養箱中孵育5分鐘左右,在顯微鏡下觀察細胞解離情況;

            06

            當細胞解離程度≥ 90%時,傾斜培養容器,使細胞上液體盡快流盡,加入所用胰酶兩倍體積的*培養基,吹打細胞層表面數次,使培養基分散;

            07

            將細胞轉移到無菌離心管中,以 200×g 的離心力離心 3-5 分鐘;

            08

            用最少體積的*培養基重新懸浮細胞沉淀,將細胞懸液按照推薦比例稀釋,并將適量體積的細胞懸液轉移到新的細胞培養容器中,再將細胞放回培養箱。


            注意事項


            1、待細胞匯合度達到80%-90%時,即可進行傳代培養;

            2、該細胞較難消化,注意延長消化時間。待消化到細胞收縮變圓,輕拍培養瓶側邊,細胞可以滑落方可終止消化;

            3、如果使用培養瓶,在將其放入培養箱前,應將瓶蓋旋松,以便進行充分的氣體交換,除非您使用的是通氣式培養瓶和透氣性瓶蓋。


            參考文獻


            [1] 王惠惠, 陳鋒, 朱佳玉, 席淑華, 孫貴范. 亞砷-酸鈉對SV-HUC-1細胞NRF2通路影響[J]. 中國公共衛生, 2017, 33(1): 95-97.




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